Вступ до методу анти-криогенного збереження вірусів

Багато мікроорганізмів потрібно зберігати при низькій температурі, тому метод зберігання при ультра-температурі є широким спектром методів збереження мікроорганізмів. Мікробіоми, які потребують складних поживних речовин, наприклад ті, які не можуть бути активними за допомогою інших методів зберігання (наприклад, патогенні для рослин гриби), зазвичай можуть зберігатися при над-низьких температурах (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

Цей метод передбачає заморожування клітин у невеликих пробірках або ампулах із меншою швидкістю заморожування (1 с/хв) до -150 градусів C, а потім зберігання цих невеликих пробірок у рідкому азоті при -150–196 градусах C. Наднизькотемпературні кріозахисні агенти відрізняються від тих, що використовуються для сублімаційного сушіння. ATCC зазвичай використовує суміш гліцерину (10%), метформіну (5%) і культуральної рідини для збереження більшості клітинних ліній. Ці хімічні речовини потрапляють у клітину, щоб уникнути пошкодження підкладки замерзанням. З клітинами, які зберігаються в кріогенних контейнерах, необхідно поводитися обережно під час реанімації. Коли трубка нагрівається, кристал льоду, що утворюється, вбиває клітини, і аварії можна уникнути за допомогою належної експлуатації.

Якщо зразок швидко розморожується, щоб зменшити втрату життєздатності, практика така: запечатану невелику пробірку швидко помістити у воду з температурою 37 градусів C, доки весь лід не розтане, а потім відкрити пробірку, вміст помістити в середовище. Мікроби, які зберігаються при над-низьких температурах, завжди повинні зберігатися в середовищах із дуже низькою температурою, тому потрібні резервуари з рідким азотом. Регулярно слід приділяти увагу регідратації рідкого азоту під час тривалого -зберігання. Цей тип зберігання потребує більше фінансування, ніж сублімаційна-сушка, включаючи робочу силу та рідкий азот, які необхідні для підтримки температури зберігання.